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Dr. Gregory House (Hugh Laurie)
Als praktizierender Arzt und Leiter der Abteilung für diagnostische Medizin, in einem Lehrkrankenhaus in New Jersey, ist er Spezialist der Nephrologie und der Infektionskrankheiten. Markenzeichen des Arztes sind seine Kleidung: Er trägt selten Arztkleidung. Immer bei sich hatte er seinen Gehstock, den er seit einem akuten arteriellen Verschluss im rechten Oberschenkel mit sich trägt. Infolge eines Infarktes wird der abhängig von Schmerzmitteln. Gegen Ende der fünften Staffel führt die Sucht so weit, dass er Halluzinationen bekommt und sich in eine psychiatrische Klinik bringen lässt.
Dr. House soll zeitweise seine Arbeit als Allgemeinmediziner wahrnehmen. Darauf hat er aber wenig Lust und das lässt er die Patienten auch spüren. Er nimmt sie nicht ernst und reagiert zynisch oder sogar boshaft auf sie. Oft hat er merkwürdige Therapievorschläge für sie wie Zigaretten für einen Patienten mit Darmproblemen. Außerdem vermeidet er es mit den Erkrankten zu sprechen, weil er der Meinung ist, dass sowieso jeder Mensch lügt.
Neben einen verdorbenen Charakter und schlechten Manieren hat er jedoch außergewöhnliche medizinische Fähigkeiten und einen großen moralischen Hintergrund, der sich jedoch nicht auf die Patienten persönlich bezieht – die seien ihm egal. Hinter der harten Fassade steckt jedoch ein verletzlicher oder verletzter Mensch. So kommt in einer Folge raus, das Dr. House als Kind misshandelt wurde.
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Dr. Eric Foreman (Omar Epps)
Der Neurologe hat zwar die beste Ausbildung, aber einen kriminellen Hintergrund durch Diebstahl. Sein Bruder ist im Gefängnis und seine Mutter hat Alzheimer. Foreman kündigt, als er gesagt bekommt, er sei so ähnlich wie House, denn er wollte nie so werden. Er nimmt eine andere Stelle an und wird rausgeschmissen, nachdem er gegen die Anweisungen seiner Vorgesetzten handelt, um einen Patienten zu retten. Er kommt zurück in das Team von Dr. House. Hier soll er für Dr. Cuddy den Spion spielen. Als House in die psychiatrische Klinik muss, übernimmt Foreman die Leitung der diagnostischen Abteilung und behält diese auch als House zurückkehrt. Nachdem House jedoch seine Approbation zurückerhält, wird er auch wieder Leiter der Abteilung.
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Dr. Allison Cameron (Jennifer Morrison)
Bereits mit 21 Jahren heiratet Allison einen Mann, der unter Schilddrüsenkrebs leidet und sechs Monate nach der Eheschließung stirbt. Dr. House ist das große Vorbild der Immunologin und manchmal erhofft sie sich sogar mehr von ihm als nur seine Anerkennung. Mit ihrer Art hält Dr. Cameron das Team zusammen und sie kann sich gut in die anderen hineinversetzen. Als jedoch einer der Ärzte das Team verlassen soll, bricht ein starker Konkurrenzkampf aus und Allison verkündet letzten Endes ihre Kündigung freiwillig. Dr. House will dies nicht akzeptieren und will sie zurückholen. Allison lässt sich unter der Bedingung darauf ein, dass House mit ihr essen gehen muss, was allerdings kläglich scheitert. Nach einer rein körperlichen Beziehung mit Dr. Chase, kommen die beiden doch zusammen. Nachdem Allison erneut kündigt, arbeitet sie in der Notaufnahme und heiratet Dr. Chase. Während Dr. Foreman Leiter der diagnostischen Abteilung ist, holt er Dr. Cameron zurück. In der sechsten Staffel scheidet sie jedoch endgültig aus.
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Dr. Robert Chase (Jesse Spencer)
Anfangs ist Dr. Chase als Spezialist für Intensivmedizin tätig, ab der vierten Staffel als Chirurg. Er stammt aus wohlhabenden Verhältnissen, doch als sein Vater die Familie verließ, verfiel Roberts Mutter dem Alkohol und starb. Zu der Zeit war Rober 16 Jahre alt. Der kreative Kopf des Teams bekam nur aufgrund eines Anrufs seines Vaters einen Platz im Team von Dr. House. Robert hat zwei Seiten: Zwar kümmert er sich aufopfernd um seine Patienten und ist oft naiv, auf der anderen Seite verhält er sich des Öfteren hinterhältig, um seinen Job zu behalten. Nachdem er von Dr. House gefeuert wird, arbeitet er als Chirurg weiterhin im Krankenhaus und steht House beratend zur Verfügung. In der sechsten Staffel kehrt er in die diagnostische Abteilung zurück.
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Dr. Chris Taub (Peter Jacobsen)
Als Dr. House ein neues Team zusammenstellen muss, ist Dr. Chris Taub der 39. Bewerber. Nachdem Dr. Taub seine Anstellung als plastischer Chirurg aufgeben musste, da er eine Affäre mit einer Krankenschwester hatte, wird er Teil des Teams um Dr. House. Anfangs wird er wegen seines Fachgebiets kritisiert, doch er findet schnell Anerkennung aufgrund seiner Fähigkeiten. Er traut sich sogar Dr. House Paroli zu bieten und setzt seine eigenen Ideen durch, auch wenn House ihm mit der Kündigung droht, falls er sich irren sollte. In der sechsten Staffel kündigt er kurz nach Dr. Houses, weil er wegen ihm erst in die Abteilung gekommen war. Als Dr. House zurückkommt, folgt auch Dr. Taub.
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Dr. Remy Hadley (Olivia Wilde)
Als Bewerberin Nr. 13 wird Dr. Remy Beauregard Hadley auch einfach Dreizehn genannt. Die Internistin ist sehr ehrgeizig aber oft auch melancholisch. Später erfährt man, dass sie Angst hat, unter der gleichen Krankheit zu leiden, an der ihre Mutter gestorben ist. Die Ergebnisse eines heimlichen Tests, den House veranlasst hat, landen ungelesen im Papierkorb. Erst am Ende der vierten Staffel erfährt man, dass sie unter der vererbbaren Krankheit leidet. Dr. Cuddy fordert House dazu auf, zwei Ärzten zu kündigen. House entscheidet sich für Dreizehn und Amber. Da jetzt nur noch Männer im Team sind, soll House eine zurückholen, was er einkalkuliert hatte, und entscheidet sich für Dr. Hadley. Als Dr. Foreman Leiter der Abteilung wird, kündigt er Remy, weil er mit ihr aufgrund der laufenden Beziehung nicht adäquat zusammenarbeiten kann. Dr. Hadley verlässt ihn daraufhin und fliegt nach Thailand. In der sechsten Staffel holt Dr. House sie zusammen mit Dr. Taub zurück ins Team.
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Dr. Lawrence Kutner (Kal Penn)
Ein weiterer Bewerber war der Sportmediziner Dr. Kutner. Er begeht zwei fatale Fehler, als er einen Defibrilator in sauerstoffangereicherter Umgebung einsetzt und ihn auf der feuchten Haut eines Patienten nutzt. Trotzdem schafft er es sich gegen seine Mitbewerber durchzusetzen, weil er auch gefährliche Techniken einsetzt und Mut beweist, oft aber ohne Rücksicht auf den Patienten. Zum Ende der fünften Staffel begeht der junge Arzt Selbstmord, was aufgrund des Ausscheidens des Schauspielers notwendig war, da dieser in ein Regierungsamt wechselte.
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Dr. James Wilson
Der Leiter der Onkologie ist der einzige und beste Freund von Dr. House. Er weiß fast immer mit seiner Art umzugehen und auch innerhalb des Krankenhauses können sie gut zusammenarbeiten. Meist liefert er House psychologische Begründungen seines Verhaltens oder das seiner Patienten, auch wenn er danach nicht gefragt wurde. Oft findet House innerhalb dieser Gespräche mit Wilson zufällig die Lösung eines Krankheitsfalles. Dr. Wilson hat oft wechselnde Beziehungen, doch als seine letzte Freundin Dr. Amber Vokalis stirbt, stürzt ihn das in eine tiefe Depression. Daraufhin taucht er erstmal ab und verlässt das Krankenhaus. Auch den Kontakt zu House bricht er ab, bis er im Laufe der fünften Staffel zurückkehrt und Dr. House überredet, sich in Behandlung zu begeben. Nach dem Aufenthalt in der psychiatrischen Klinik zieht House vorübergehend bei Wilson ein, der noch in Ambers Wohnung lebt.
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Dr. Lisa Cuddy (Lisa Edelstein)
Die Vorgesetzte von Dr. House ist Leiterin des Princeton-Plainsboro Teaching Hospitals. Sie lebt in keiner Beziehung, doch nach mehreren erfolglosen künstlichen Befruchtungen, adoptiert sie ein Kind. Ihren Ehrgeiz erkennt man daran, dass sie die bisher jüngste als auch die erste Frau in der Position der Direktorin ist. Oft geraten sie und Dr. House aneinander, weil sie mit seinen unkonventionellen Methoden und seinem Verhalten gegenüber Patienten nicht einverstanden ist und das mit ihm ausdiskutieren möchte.
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