Nachdem die ursprünglich geplante Übernahme von n-tv durch die ProSiebenSat.1 Media AG platzte, kam der Sender mit der Idee, einen eigenen Nachrichtensender zu starten. Seit Beginn des Senders im Jahr 2000 bildeten Nachrichten den Schwerpunkt. Im Jahr 2002 wollte der Sender durch eine Neuausrichtung seinen Marktanteil stärken und nahm fortan mehr Dokus und Magazine ins Programm. Auch Talkshows werden gesendet. Nachrichten gibt es immer zur vollen Stunde, manchmal auch im 30 Minuten-Takt. Diese fallen dann aber kürzer aus.
Die Dokumentationen werden von Montag bis Freitag gegen 17:00 Uhr und 22:00 Uhr gezeigt. Ein Talkshow-Format, welches schnell Berühmtheit erlangte, war "Natascha Kampusch trifft". Das Entführungsopfer Natascha Kampusch trat hier als Moderatorin auf. Es erschienen jedoch nur drei Folgen. Den größten Marktanteil konnte N24 bisher mit der Übertragung der Trauerfeierlichkeiten anlässlich Michael Jacksons Tod erzielen.
Charakteristisch für N24 ist das fortlaufend eingeblendete Nachrichtenband am unteren Bildschirmrand, welches nur während Werbeunterbrechungen nicht gezeigt wird. 2008 hat N24 sein Internetangebot modernisiert und positioniert dieses seitdem als Videonachrichten-Portal. Auch das laufende Programm kann auf der Internetseite von N24 verfolgt werden.